他们系统地研究了红细胞在保护剂添加、降温、冻干、复水、洗脱过程中的损伤机理，优化了红细胞冻干的保护剂配方和降温、冻干、复水及保护剂洗脱程序，形成了一套红细胞冻干保存方法。
 
冻干红细胞的复水损伤是目前冻干红细胞复水后回收率低的一个重要原因，“主要表现为在复水时样品吸水后细胞立即破碎”。何立群说：“细胞在复水时的损伤与前面的过程有关，因此复水损伤机理很复杂，了解它也就变得异常重要。我们在实验中发现了其中的一个原因，即红细胞膜在复水阶段存在两个结构转变的温度点，复水时细胞内物质非常容易流出来。实验表明，样品复水温度不能低于35℃。”
 
解决溶液损伤问题
 
令何立群颇为满意的另外一个工作，就是发现了冻干保护剂的“破坏”效应。无论是深低温保存法还是冷冻干燥保存法，添加保护剂都是必须的。其目的是为了降低细胞在低温环境中细胞内外冰晶造成冰晶损伤的可能性，但是保护剂同时也会带来溶液损伤，尤其是保护剂浓度很高的时候。溶液损伤包括保护剂对细胞产生的毒性以及细胞在体积膨胀或收缩到一定程度时所受到的渗透性损伤。
 
相比于细胞低温保存，冻干保存所需要的保护剂种类很多，故研究人员往往会把注意力集中在如何选择更好的保护剂，尚无暇顾及保护剂总量是否已经超标。他的课题组在确定红细胞承受的渗透压极限后发现，一些冻干保存方法中细胞损伤实际上发生在添加保护剂过程中，即渗透性损伤。
 
为了减少渗透性损伤，他们发现，保护剂的添加和取出过程分四步完成效果好一些。添加时，四步等体积法对红细胞损伤最小。四步等体积法即，将保护溶液分4次逐步加入，每次加入的体积相等，每次加入后都轻轻摇匀，使得红细胞和保护剂混合；而取出时，每一步渗透压减少幅度相等效果最好。
 
另外，他们还通过实验发现，在不同降温速率下，红细胞冻干复水后的回收率会有所变化。
 
鉴定专家认为，该项目建立并优化了红细胞冻干复水的技术参数；在渗透性损伤的研究、保护剂的优化、降温速率等因素对红细胞冻干的影响和程序选择方面，具有明显的创新性和先进性，达到国内领先水平。
 
目前，他们的冻干红细胞复水回收率已经达到了50%左右，但是距红细胞存活率70%的目标还有一段距离。刘忠说：“这个项目目前还处于实验室阶段，接下来要进行动物试验，但是要实现临床试验，还有很多工作要做。”
 
从红细胞冷冻干燥到复水还原，整个过程大概需要一整天的时间，“尤其是复水的过程，设备比较复杂，大概需要10个小时才能完成”。刘忠希望在今后的实验中能够将这个时间再缩短些。